第二次均质后，裂解的细胞溶液通过离心泵抽回。但这一次，我们的目标不同。在裂解之前，我们的产品被保存大肠杆菌细胞中。现在，随着细胞分裂，包括细胞质和绿色荧光蛋白在内的细胞内容物被混合到缓冲溶液中。离心机再次排出固体——主要是细胞碎片——剩下的就是含有我们产品的澄清液体——绿色荧光蛋白!这一次我们丢弃固体而保留液体——现在这种液体被称为裂解液。

使用游离脂肪酸含量大于或等于5% 的原料制备生物柴油时，重点在于将游离脂肪酸的转化，这里将介绍四种催化技术。

细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术，目前已发展了多种细胞破碎方法，以便适应不同用途和不同类型的细胞壁破碎。

当所有的洗脱液都被收集后，就到了采用疏水相互作用层析法的时候了。疏水相互作用层析法是基于树脂表面的疏水化学物质与GFP蛋白上的疏水贴膜相结合的原理。

所有的细胞都需要营养。合理调配的培养基含有细胞生长和生产所必需的营养物质。添加所有这些组分酵母提取物、胰蛋白酶、酱油、肉汤、氯化铵、二磷酸钠、磷酸二氢钾和抗泡沫化合物，再加入10公斤纯净水。关闭所有的端口和阀门，打开所有凝结水阀门，对生物反应器进行SIP灭菌循环。灭菌条件是121摄氏度，持续30分钟。一旦达到目标，凝结水阀门就会关闭，SIP循环就会自动完成。现在容器和培养基都是无菌的，我们已经准备好向培养基中添加最后的成分。详情请收看本视频吧。

布伦瑞克社区大学水产养殖和生物技术中心实施了一个以藻类生产生物燃料的项目。这包括在项目第一阶段设计并建造一个容量为1800加仑的光生物反应器系统。第二阶段主要是石油开采的下游加工。

当所有的裂解液都进入层析柱时，或者当凝胶柱与蛋白质结合的能力达到上限，就是洗脱的时候了。洗脱就是用一种新的溶液从层析柱中释放绿色荧光蛋白——在这种情况下，我们采用的是一种包含氯化钠溶液的缓冲液。当新的缓冲液通过凝胶珠泵入层析柱时，在某一时刻，绿色荧光蛋白不再与凝胶珠结合，并被释放到缓冲液中。产生的产物流通常被称为洗脱物。紫外光密度传感器测量蛋白质浓度并指示产品何时开始从柱中洗脱。

反渗透和超滤是市场上最受欢迎、最有效的两种水过滤技术。虽然反渗透和超滤都具有显著的过滤性能，但它们也有一些关键的区别。我们将在节目中就两者的区别进行讨论。