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细胞破碎法2
时长:5 分钟
类别:化工生物技术
简介:细胞破碎是生物技术产业化关键技术,目前已发展了多种细胞破碎方法,以便适应不同用途和不同类型的细胞壁破碎,节目中全面概述了常见的细菌破碎技术。
标签:
教学
化工生物技术
细胞破碎
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超滤操作和反冲洗步骤
超滤是以压力为推动力的膜分离技术之一。节目结合原理图讲解了超滤的操作流程以及反冲洗所需要的步骤。
GFP恢复 1概述
发酵完成后,捞出肉汤并送回回收。把大肠杆菌的宿主细胞从液体培养基中分离出来,然后悬浮在一种新的溶液中清洗细胞。
培养基
所有的细胞都需要营养。合理调配的培养基含有细胞生长和生产所必需的营养物质。添加所有这些组分酵母提取物、胰蛋白酶、酱油、肉汤、氯化铵、二磷酸钠、磷酸二氢钾和抗泡沫化合物,再加入10公斤纯净水。关闭所有的端口和阀门,打开所有凝结水阀门,对生物反应器进行SIP灭菌循环。灭菌条件是121摄氏度,持续30分钟。一旦达到目标,凝结水阀门就会关闭,SIP循环就会自动完成。现在容器和培养基都是无菌的,我们已经准备好向培养基中添加最后的成分。详情请收看本视频吧。
溶剂诱导结晶
溶剂诱导结晶又称为液体诱导结晶,它是结晶性高聚物在溶剂作用下,在低于通常Tg下诱导结晶,而在高于通常Tg时能加速结晶的现象。本节目主要对溶剂诱导结晶的机理进行了讨论。
发酵的四个阶段
不同的细胞有不同的需求。有些好氧,有些厌氧。但是几乎所有细胞的生命周期都遵循一个可预测的阶段模式。迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。
GFP纯化 6浓缩和透析
在纯化过程中,我们将使用切向流过滤方式完成两项不同的任务:浓缩和过滤。当溶液通过切向流过滤设备时,它会离开供应罐……通过一个泵……通过压力传感器……然后穿过滤膜。所有通过膜的物质,包括缓冲溶液,都被称为渗透物。GFP蛋白大于膜上的孔隙,会被保留下来。被保留的物质——渗余物——再循环到供应槽。如此循环,直到达到所需浓度的绿色荧光蛋白。
GFP恢复 2离心法
绿色荧光蛋白的恢复开始于肉汤罐的到来。用一根无菌软管从肉汤槽连接到盘式离心分离机,然后对容器加压,将肉汤送入离心分离机。一旦离心机达到稳定的运行速度……入口阀门打开,肉汤进入碗中。详情收看本视频。
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