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细胞破碎法2
时长:5 分钟
类别:化工生物技术
简介:细胞破碎是生物技术产业化关键技术,目前已发展了多种细胞破碎方法,以便适应不同用途和不同类型的细胞壁破碎,节目中全面概述了常见的细菌破碎技术。
标签:
教学
化工生物技术
细胞破碎
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GFP恢复 1概述
发酵完成后,捞出肉汤并送回回收。把大肠杆菌的宿主细胞从液体培养基中分离出来,然后悬浮在一种新的溶液中清洗细胞。
GFP纯化 3洗脱
当所有的裂解液都进入层析柱时,或者当凝胶柱与蛋白质结合的能力达到上限,就是洗脱的时候了。洗脱就是用一种新的溶液从层析柱中释放绿色荧光蛋白——在这种情况下,我们采用的是一种包含氯化钠溶液的缓冲液。当新的缓冲液通过凝胶珠泵入层析柱时,在某一时刻,绿色荧光蛋白不再与凝胶珠结合,并被释放到缓冲液中。产生的产物流通常被称为洗脱物。紫外光密度传感器测量蛋白质浓度并指示产品何时开始从柱中洗脱。
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发酵需要严格监测和控制生物反应器内的环境。该反应器配备了一个水套来调节温度,并集成传感器来监测关键因素,如溶解氧,pH值,内部温度,水套温度和容器压力。反应器也有一个搅拌器,用于添加菌种储备和培养基成分的专用端口,酸、碱补充的单独端口,用于供气和排气的空气过滤器,以及用于抽取样本及收获的阀门。多数情况下,发酵过程和监测功能可以从生物反应器的专用过程控制器进行管理。
亲和色谱法
到目前为止,我们已经了解了蛋白质分离纯化的四种方法,今天,我们将介绍第五种——亲和色谱法。该法可用于分离活体高分子物质、过滤性病毒及细胞。或用于对特异的相互作用进行研究。
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反胶束是分散于连续有机相中的、由表面活性剂所稳定的纳米尺度的聚集体。而双水相萃取则是在两种双相形成的双水相系统中进行分离过程的技术。节目列举了这两种技术的异同点。
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