所有的细胞都需要营养。合理调配的培养基含有细胞生长和生产所必需的营养物质。添加所有这些组分酵母提取物、胰蛋白酶、酱油、肉汤、氯化铵、二磷酸钠、磷酸二氢钾和抗泡沫化合物，再加入10公斤纯净水。关闭所有的端口和阀门，打开所有凝结水阀门，对生物反应器进行SIP灭菌循环。灭菌条件是121摄氏度，持续30分钟。一旦达到目标，凝结水阀门就会关闭，SIP循环就会自动完成。现在容器和培养基都是无菌的，我们已经准备好向培养基中添加最后的成分。详情请收看本视频吧。

这些细胞再次以浆糊的形式出现，准备进行下一步——细胞分裂，也称为裂解。细胞在缓冲溶液中复苏，然后在高压900巴——大约是每平方英寸13000磅泵入高速搅拌器。在高速搅拌器内部，它们被强行通过一个小孔。就像气球被紧紧挤压一样，细胞无法承受压力——它们会破裂。确保所有的大肠杆菌细胞破裂，溶液再次循环通过高速搅拌器。

高效液相色谱法由于其分离效率高、选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广等特点成为广大分析工作者的首选分析方法。

不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。SephadexG-50葡聚糖凝胶 G-50 分离范围 1500-30000 适用于多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定。

发酵需要严格监测和控制生物反应器内的环境。该反应器配备了一个水套来调节温度，并集成传感器来监测关键因素，如溶解氧，pH值，内部温度，水套温度和容器压力。反应器也有一个搅拌器，用于添加菌种储备和培养基成分的专用端口，酸、碱补充的单独端口，用于供气和排气的空气过滤器，以及用于抽取样本及收获的阀门。多数情况下，发酵过程和监测功能可以从生物反应器的专用过程控制器进行管理。

疏水作用色谱技术是目前在实验室和生物制药领域广泛应用的一种蛋白质分离技术。这里解释了疏水作用色谱技术的原理。

当从回收过程中得到的澄清的裂解液的转移罐连接到色谱橇上的入口泵时，净化过程就开始了。在我们的GFP纯化过程中的第一个步骤是阴离子交换。在此过程中，澄清的裂解液的pH值约为8.0，这意味着该蛋白带负电荷。因为GFP带负电荷，所以它会与带正电荷的阴离子交换。详情收看视频了解。

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。在接下来的节目中我们就将讨论蛋白质的纯化方法以及纯化过程。