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超声波破碎法提取蛋白质

时长：5 分钟

类别：化工生物技术

简介：超声波细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能来进行细胞破碎的方法。本节目介绍了研究人员利用SONICA超声浴来进行细胞破碎的操作过程。

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反渗透和电渗析

利用电渗析、反渗透两种方法进行水处理脱盐，即在浓溶液一边加上比自然渗透压更高的压力,以实现水淡化或降氟的目的。
钠离子交换软化原理

水的硬度一般由钙、镁形成及表示，一般采用阳离子交换树脂，将水中的钙离子和镁离子置换出来以达到软化水的目的。节目介绍了钠离子交换软化原理。
发酵循环

将接种软管与反应器连接并蒸20分钟后，将扩大培养的菌株储备泵入含有培养基的反应器中。现在发酵开始了。操作人员记录开始的读数，并监控间歇温度、搅拌器转速、溶解氧水平、pH值、容器压力、光密度、空气流速和葡萄糖浓度。当葡萄糖和光密度达到目标水平时，就需要向软管中加入IPTG，“开启”细胞中绿色荧光蛋白的表达。约5小时后，采集最终读数并绘制样本以检查细胞固体的百分比
凝胶电泳

本动画介绍了凝胶电泳的基本原理，包括设备的设置和使用，DNA样本的装载，分子分离的概念，凝胶分析，以及常见的电泳应用。
GFP纯化 3洗脱

当所有的裂解液都进入层析柱时，或者当凝胶柱与蛋白质结合的能力达到上限，就是洗脱的时候了。洗脱就是用一种新的溶液从层析柱中释放绿色荧光蛋白——在这种情况下，我们采用的是一种包含氯化钠溶液的缓冲液。当新的缓冲液通过凝胶珠泵入层析柱时，在某一时刻，绿色荧光蛋白不再与凝胶珠结合，并被释放到缓冲液中。产生的产物流通常被称为洗脱物。紫外光密度传感器测量蛋白质浓度并指示产品何时开始从柱中洗脱。
发酵：按比例增加

绿色荧光蛋白的发酵过程是从细菌菌种储备的扩大培养开始。从冰箱中取出一份改良大肠杆菌样本并进行解冻。把它放入摇瓶中接种少量的新鲜培养基。培养基提供细胞生长所需的营养。当细胞生长并消耗了大部分的营养物质后，它们被转移到一个更大的容器中，那里有更多的生长介质，这个过程重复进行……当细胞数量足够大且足够健康，可以转移到生产容器中时，这种扩大就完成了——通常我们称之为生物反应器或发酵器。
色谱法基础知识

色谱法又称"色谱分析"、"色谱分析法"、"层析法"，是一种分离和分析方法，节目介绍了纸、薄层、柱、离子交换、亲和、高效液相色谱等技术的基本原理。
亲和层析法

根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立起来的色谱法称亲色谱法。在这里我们将在实验室中使用辛巴蓝F3G固载琼脂糖珠来分离样品中的乳酸脱氢酶。

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