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发酵循环

时长：2 分钟

类别：化工生物技术

简介：将接种软管与反应器连接并蒸20分钟后，将扩大培养的菌株储备泵入含有培养基的反应器中。现在发酵开始了。操作人员记录开始的读数，并监控间歇温度、搅拌器转速、溶解氧水平、pH值、容器压力、光密度、空气流速和葡萄糖浓度。当葡萄糖和光密度达到目标水平时，就需要向软管中加入IPTG，“开启”细胞中绿色荧光蛋白的表达。约5小时后，采集最终读数并绘制样本以检查细胞固体的百分比

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当所有的裂解液都进入层析柱时，或者当凝胶柱与蛋白质结合的能力达到上限，就是洗脱的时候了。洗脱就是用一种新的溶液从层析柱中释放绿色荧光蛋白——在这种情况下，我们采用的是一种包含氯化钠溶液的缓冲液。当新的缓冲液通过凝胶珠泵入层析柱时，在某一时刻，绿色荧光蛋白不再与凝胶珠结合，并被释放到缓冲液中。产生的产物流通常被称为洗脱物。紫外光密度传感器测量蛋白质浓度并指示产品何时开始从柱中洗脱。
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